超声波辅助提取人参果叶黄酮工艺研究

 王顺新1，牟德华2，王小伟1

 1．河北女子职业技术学院（石家庄050091）；2．河北科技大学生物工程学院（石家庄050000）

摘要试验以人参果叶为原料，研究人参果叶黄酮的提取工艺。研究结果表明：人参果叶黄酮提取最佳工艺条件为超声时间为55 min，超声功率为320 w，甲醇质量分数为80%，料液比为1：20 (g/m L)，所得人参果叶黄酮类化合物的提取率为1.39%。

关键词人参果叶；黄酮化合物；超声；提取

 人参果（Solanum muricatum）又名香瓜茄，长寿果、凤果等，属茄科类多年生双子叶草本植物。人参果具有高蛋白、低脂肪、低糖等特点，富含维生素C和锌、铁、硒、铬等人体所需的多种微量元素，对防治糖尿病、心脏病，调节血脂等具有很好的辅助功能，是一种营养丰富的保健水果，越来越倍受人们的青睐。目前，对人参果已有相关开发利用，但对人

参果等其他部位利用较少，研究表明人参果叶含有黄酮类化合物、多糖、有机酸多种活性成分。其中黄酮类化合物为人参果叶中重要的功能因子，为了开发利用人参果资源，对人参果叶中黄酮类化合物的提取方法进行了研究，以期为人参果资源的综合开发提供依据。

1  材料与方法

1.1试验材料与设备

  人参果叶：采集于当地人参果种植基地，洗净烘干，粉碎后备用。

 芦丁标品：中国药品生物制品检定所(纯度99.9%)；无水甲醇、甲醇、硝酸铝、氢氧化钠：分析纯。

  超声提取器：惠州立升仪器有限公司；Cary50紫外可见分光光度计：美国瓦里安；FW117中草药粉碎机：天津泰斯特仪器有限公司；DGG-9140B电热恒温鼓风干燥箱：上海森信实验仪器有限公司；SHZ-D(Ⅲ)循环水式真空泵：巩义市予华仪器有限责任公司；GR-200电子天平：日本AND。

1.2标准曲线的绘制

 精密称取芦丁标品5.001 mg加60%甲醇溶解，定容至50 m L，即为100μ g/m L芦丁标准溶液。分别量取标准溶液0，5，10，15，20和25 m L用60%甲醇（质量分数）定溶至50 m L。相应试剂作空白对照，在最大吸收波长510 nm处测吸光度A。以吸光度A为横坐标，以相应容量瓶中芦丁含量( mg/m L)为纵坐标，绘制标准曲线。回归方程为y=2.15x+0.314，相关系数R2=0.999。

1.3人参果叶黄酮的提取工艺研究

 准确称取预处理的粉末5.00 g，以一定料液比甲醇溶液为溶剂，一定温度超声处理一段时间提取黄酮，随后将提取液真空浓缩至干燥，并用60%甲醇溶解，在波长510 nm处测定吸光度，计算测定液中黄酮化合物浓度，换算成提取量。取3次平均值作为测量结果。

2结果与分析

2.1人参果叶黄酮超声提取条件的优化

2.1.1料液比对人参果叶黄酮提取效果的影响

 设定超声功率为320 W，超声时间为45 min，甲醇质量分数为80%，分别在料液比为1：5，1：10，1：15，1: 20，1: 25和1：30( g/m L)5个梯度下，按方法1.3提取人参果叶黄酮。由图1可以看出，料液比控制在1：20( g/m L)左右较为适宜。

2.1.2甲醇质量分数对人参果叶黄酮提取效果的影响

  设定超声功率为320 W，超声时间为45 min，料液比为1：20( g/m L)，分别在甲醇质量分数为50%，60%, 70%，80%，90%和100%6个梯度下，按方法1.3提取人参果叶黄酮。由图2可以看出，甲醇质量分数控制在80%左右较为适宜。

2.1.3超声功率对人参果叶黄酮提取效果的影响

  设定甲醇质量分数为80%，超声时间为45 min，料液比为1：20( g/m L)，分别在超声功率为200，240，280，320，360和400 W 6个梯度下，按方法1.3提取人参果叶黄酮。由图3可以看出，超声功率控制在320 W左右较为适宜。

2.1.4超声时间对人参果叶黄酮提取效果的影响

  设定甲醇质量分数为80%，超声功率为320 W，料液比为1：20(g/m L)，分别在超声时间为15，25，35，45，55和65 min 6个梯度下，按方法1.3提取人参果叶黄酮。由图4可以看出，超声时间控制在45min左右较为适宜。

2.2正交试验结果及分析

 根据单因素试验结果，为进一步确定微波提取人参果叶黄酮类化合物的最佳工艺条件，以超声时间、超声功率、甲醇质量分数和料液比为考察因素，选用L9(34)正交表进行4因素3水平正交试验，因素水平见表1，正交试验结果分析见表2。

 由表2可知，影响超声波提取人参果叶黄酮类化,合物的因素主次顺序为D>B>A>C，即料液比对人参果叶黄酮类化合物影响最大，其次是超声功率，超声时间和甲醇质量分数。同时可得超声波提取人参果叶黄酮类化合物的最佳工艺条件是：A3B2C2D2，即超声时间为55 min，超声功率为320 W，甲醇质量分数为80%，料液比为1：20( g/m L)。

  为进一步考察上述优选工艺的稳定性，按上述的最佳条件：A3B2C2D2，即超声时间为55 min，超声功率为320 W，甲醇质量分数为80%，料液比为1：20( g/m L)，进行3次平行试验，所得人参果叶黄酮类化合物的平均提取率为1.39%。

3结论

  在试验条件下，料液比是影响人参果叶黄酮类化合物提取效果的最主要因素，通过正交试验得出人参果叶黄酮类化合物的最佳提取工艺：超声时间为55min，超声功率为320 W，甲醇质量分数为80%，料液比为1：20( g/m L)，所得人参果叶黄酮类化合物的提取率为1.39%。因此，从人参果叶中提取黄酮类化合物有广阔的应用前景。