作者；郑晓敏
半滑舌鳎味道鲜美、肉质细嫩、营养丰富，深受广大消费者欢迎，其市场价值极高，养殖前景非常广阔，已成为我国海水增养殖鱼类优良品种。随着人们生活水平的不断提高，以及电子商务技术的不断发展，中西部地区对海水鱼类的消费急剧增加，因此，新型电商模式下，如何实现海水鱼类向内陆地区低成本、高成活率的运输流通是亟待解决的问题。
低温保活运输是一种低成本、高存活率、长时间、高品质，且优于其它相关技术的绿色保活方法该技术在水产品中的研究历史虽然较长，但是研究比较分散，不成体系，缺乏应用。我国对水产品无水保活运输技术研究的学者较多，主要对大菱鲆、泥鳅、中华鳖、罗非鱼进行了研究，结果均表明能够有效地延长保活时间、提高成活率、降低成本。随着该技术研究的不断深入系统，学者们发现有部分水产品采用低温无水保活方法并不能获得良好的保活效果。因此，国家农产品现代物流工程技术研究中心对水产品活体物流技术提出了“有水物流的优化，无水物流的革新”指导思想。目前，对半滑舌鳎无水保活技术的研究尚未见报道。因此，试验研究了不同温度对半滑舌鳎无水保活时间与成活率的影响，以及对半滑舌鳎的呼吸强度、肌糖原和血清生化指标的影响，旨在为半滑舌鳎的保活运输提供参考。
1 材料与方法
1.1材料与处理
1.1.1材料
半滑舌鳎：市售，挑选体格健壮，色泽光亮，新鲜而活跃，个体大小均匀，健康无疾病的半滑舌鳎用于试验，每尾全长约( 55±10)cm，体重约( 1.5±0.5) kg。
1.1.2主要仪器与设备
日立7170S全自动血液生化分析仪；德国BINDERKB240高精度低温培养箱；德国Test0 327-1气体分析仪；Centrifuge 5804r台式高速冷冻离心机；METTLERAE240电子天平；南京建成生物工程研究所肌糖原试剂盒。
1.1.3处理方法
选取40尾鲜活半滑舌鳎放入水温为1 8℃的暂养桶中进行暂养，对暂养桶进行连续充氧，停止投饵，暂养48 h后，调节温度调控系统并以2℃/h降温速率降至2℃时，将其打捞出桶，分别移至不同的塑料袋(约6L)中，排除空气，充人纯氧，采用橡皮筋进行密封处理，以每10尾一组，分别移入0℃ ，3℃，6℃和9℃，4个不同温度的冷库中进行无水保活（分别记为0℃组，3℃组，6℃组和9 ℃组），同时，分别在保活第0，第6，第12，第24，第36和第48小时时测定桶内O2和CO2含量；另取60尾鲜活半滑舌鳎，按上述同样方法进行处理，每组3尾。在保活第0，第6，第12，第24和第36小时时取出3尾，采集血液及背部肌肉。
1.1.4样品的制备
血清样品的制备：采用MS-222对取出的半滑舌鳎进行快速麻醉，用200 m L不加抗凝剂的注射器从尾静脉取血，静置于4 cc冰箱2 h，待血液明显分层后，在4℃下以3 000 r/min离心15 min后分离，用移液枪吸取上清液即血清，放于-20 ℃低温冰箱中暂存，用于血清皮质醇含量和血清生化指标的测定；
肌肉样品的制备：将半滑舌鳎取完血液后，用剪刀剪取其的背部肌肉，去除其表皮，用蒸馏水冲洗干净，再用滤纸吸干背部肌肉上的水分；放置-20 ℃低温冰箱中暂存，用于肌糖原的测定。
1.2测定项目及方法
O2和CO2含量的测定：采用德国Test0 327-1气体分析仪测定；肌糖原的测定：采用南京建成生物工程研究所肌糖原试剂盒法测定；血液生化指标的测定：待血清采集后，在全自动生化分析仪上测定。
1.3数据处理
所有试验数据由SPSS 11.5程序包进行生物学统计。
2结果与分析
2.1 不同温度对半滑舌鳎无水保活过程中成活率的影响
成活率是表明活鱼保活效果的关键指标，其高低直接说明保活方法是否可行。由图1可知，除了3℃ 组以外，其它试验组均随着无水保活时间的延长，成活率逐渐降低。其中，9 ℃组随保活时间的增加其死亡速率最快，但保活至48 h时，其成活率高于0℃组。3℃ 组在无水保活期间始终无死亡率，在该温度下半滑舌鳎保活效果最佳，能够维持较长的保活时间。其次，6℃组在保活24 h时，成活率仍能够达到90%。由图中数据可以得出，在对鱼类进行无水保活贮运时，温度不易过高或过低，应该选择适宜的低温进行保活，环境温度偏高或偏低均影响其存活时间及成活率。
2.2不同温度对半滑舌鳎无水保活过程中O 2消耗量的影响
鱼类在有水环境中，则是通过鳃盖的闭合使水流流过鳃丝，从而达到呼吸的目的，维持生命特征。当鱼类在无水保活贮运过程下，只能通过鳃的闭合直接与空气结合进行呼吸作用，但该方式的呼吸效率上不明确。由图2可以看出，随着无水保活时间的延长保活袋中的O2含量缓慢减低，从而被袋内的半滑舌鳎消耗。随着无水保活温度的升高，半滑舌鳎对O2消耗量就越大。0℃ 组在无水保活至36 h时，其O 2含量任然能够达到91.1%，而9℃组已经降至66.8%。这表明保活温度越低，半滑舌鳎对 O 2的需求量就越少。但无水保活温度过低则不利于进行有效的保活贮运。
2.3不同温度对半滑舌鳎无水保活过程中CO2含量的影响
由图3可以看出，半滑舌鳎在无水保活过程中，其对CO2的释放量与对O2的消耗量呈现相反的变化趋势。这表明随着无水保活温度的升高其CO2的排泄量逐渐增加。9℃ 组在无水保活期间，其CO2的变化曲线呈明显的递增趋势，而且增加速率明显高于其它组别。0℃组在保活过程中CO2的排放量较少，递增速率为各个组别中最低。
2.4不同温度对半滑舌鳎无水保活过程中肌糖原的影响
肌糖原是反应动物对外界环境应激程度的重要指标，其变化规律能够清晰的反应机体对环境的适应情况。由图4可知，在对半滑舌鳎进行无水保活前（即第0小时时），其肌糖原含量为正常值且较高，达6.21mg/g。在保活期间，各试验组肌糖原含量呈现下降趋势，且差异显著(p<0.05)。0℃组在保活过程中肌糖原含量的降低速率最大，表明温度越低对半滑舌鳎机体的影响越大，应激强度较大。其它各组肌糖原含量的变化趋势较接近，仅9℃组肌糖原含量下降较慢，表明温度约高对其影响约小。
2.5不同温度对半滑舌鳎无水保活过程中血清皮质醇的影响
在逆境胁迫研究中，动物机体内血浆或血清皮质醇激素含量变化发展趋势是反应应激水平的关键性指标。由图5可以得出，各试验组中半滑舌鳎血清皮质醇含量主要呈上升后下降的变化趋势。由于无水保活温度的变化，各组血清皮质醇含量也随之变化。其中，0℃ 组，6 ℃和9℃组在无水保活12 h时，皮质醇含量达到最高值，而3℃组则在6h时达到最大值。同时，3℃在第12和第36小时时皮质醇含量显著低于(p<0.05)其它各组，并与第0小时时皮质醇含量较为接近，这表明，该温度对半滑舌鳎应激反应影响较小。
2.6不同温度对半滑舌鳎无水保活过程中血清生化指标的影响
随着外界环境的变化水产品血清生化指标也会随之发生变化，同时，相关生化指标是测定其适应性的重要指标。由表1可知，与保活前相比，无水保活过程中各组血清中谷丙转氨酶( GPT)含量逐渐降低，而且含量差异显著(p<0.05)，随着无水保活时间的延长，其含量虽然降低，但是差异不显著(p>0.05)。0℃组谷草转氨酶(AST)含量在保活期间均高于保活前，仅在36 h时略偏低。其它各组均谷草转氨酶( AST)含量均低于保活前，其中，0℃组AST含量始终保持与Oh接近，这表明，该温度下最有利于无水保活时间的延长以及成活率的升高。
3结论
对于冷血动物而言，温度是影响机体生理生化反应变化，乃至其生存状态的重要因素。鱼类在水环境中正常的生长发育，这与水温环境存在着密切的关系。同样，在无水保活研究中，温度仍然能够作为关键的控制因子影响其生存。试验研究了在无水保活过程中，不同环境温度对半滑舌鳎保活时间、成活率和呼吸作用等相关生理生化指标的影响。通过对半滑舌鳎机体生理生化指标的分析，探索其最佳无水保活工艺技术，从而确定最适宜无水保活温度为3℃，为实际应用提供理论依据。
4摘要 旨在研究半滑舌鳎最佳无水保活工艺，探索了0℃，3℃，6℃及9℃环境温度下半滑舌鳎的成活率，O2消耗量、CO2排放量、肌糖原含量、血清皮质醇含量及生化指标的变化。结果表明3℃为半滑舌鳎最佳无水保活温度。
