离子色谱法检测蜂蜜中淀粉糖浆

 陈伟，乔勇升，袁华峰

 泰州市食品药品检验所（泰州225300）

摘要为了更好地了解市场上蜂蜜中淀粉糖浆的掺假情况，检测了随机抽取的一批蜂蜜，发现其中掺假蜂蜜主要以掺入果葡糖浆为主，并且对于标准中未出现的一种判定阳性的依据进行加标试验验证，可以作为判断蜂蜜掺假的辅助参考依据。

关键词蜂蜜；离子色谱；淀粉糖浆

 蜂蜜是药食同源的天然保健食品，具有很高的营养价值，一直深受消费者的青睐。然而，市场上伪劣掺假蜂蜜相当普遍，蜂蜜造假已经形成规模化、专业化趋。大量假蜂蜜进入市场，严重威胁着消费者的健康，影响了我国蜂蜜产业的健康发展。

 蜂蜜中固体物质有95.0%～99.9%是糖类，占总成分的70%～80%，这些糖分以单糖为主（即葡萄糖和果糖），通常占蜂蜜总成分的60%以上；其次是双糖，双糖中以蔗糖占绝对优势，其含量从0～5%；其余是麦芽糖、海藻糖、松二糖和昆布二糖等；此外还有少量的多糖，如松三糖、麦芽三糖等。目前，蜂蜜造假手段以利用粮谷加工成果葡糖浆，充当蜂蜜最为普遍。淀粉糖浆，是淀粉经不完全水解得到的混合糖汁，主要是麦芽糖、葡萄糖和寡糖等各类糖分子的混合物，且各种淀粉糖浆中均含五糖以上的寡糖。依据GB/T 21533_2008中的方法，使用凝胶体积排除法去除检样中的单糖，将寡糖富集后直接经阴离子交换色谱一电化学检测器检测，将五糖以上寡糖的存在来判定受检蜂蜜中有否掺人淀粉糖浆。试验是在检测了随机抽取的一大批蜂蜜的基础上，对于判定蜂蜜掺假的依据进行了一些补充和验证。

1  材料与方法

1.1仪器与试剂

 Dionex ICS-5000离子色谱仪；电化学检测器；聚丙烯酰胺凝胶（Bio-Gel P-2）；氢氧化钠溶液：50%, Fluka公司；乙酸钠：≥99.0%，Sigmla；麦芽糖：≥99%，东京化成工业株式会社；麦芽三糖：≥98%，东京化成工业株式会社；麦芽四糖：≥95%，东京化成工业株式会社；麦芽五糖：≥95%，东京化成工业株式会社；麦芽六糖：≥95% ，Toronto Research

 chemicals；麦芽七糖：≥95%，Toronto Research chemicals; Mmi-Q Advantage Al0超纯水机：

Millipore，美国；市场上随机抽取的蜂蜜。

1.2标准溶液和淋洗液的配制

 麦芽糖标准储备液1 mg/m L:分别称取麦芽糖、麦芽三糖、麦芽四糖、麦芽五糖、麦芽六糖和麦芽七糖标准物质各10.0 mg，用水分别溶解定容至10 m L。1 L水中加入50%氢氧化钠溶液10.4 m L和16.84 g乙酸钠，溶解过滤后通氮气保存。

1.3样品制备

 称取均匀的蜂蜜2.5 g作为试样，用水定容25 m L，用0.23 μm水性滤膜过滤。取2 m L滤液加入到聚丙烯酰胺凝胶层析柱中，依次加入3，5和2 m L水进行冲洗，收集最后2 m L液体摇匀后上机待测。用纯蜂蜜作为阴性对照品，蜂蜜中加入5%的果葡糖浆作为阳性对照品，按照上述步骤进行操作。

1.4色谱条件

 分析柱：Carbo Pac PA200( 250 mm×3 mm)；保护柱：Carbo Pac PA200( 50 mm×3 mm)；电化学检测器；Au工作电极电极；Ag/Ag Cl参比电极；糖标准四电位波形见图1。

流动相A: 100%水，流动相B：200 m mol/L氢氧化钠，200 m mol/L乙酸钠，梯度洗脱条件见表1。进样方式：自动进样；进样体积：25μ L；柱温：30℃。

2结果与讨论

2.1标准品谱图、纯蜂蜜谱图和阳性谱图

 图2～5分别为麦芽糖标准混合使用液、纯蜂蜜阴性对照品、含5% F42型果葡糖浆和含5% F95型果葡糖浆的对照谱图。

 综合图2～3可以看出，纯的蜂蜜从麦芽五糖到麦芽七糖及麦芽七糖以后的时间都没有出现寡糖峰。图4中出现了典型的P1和P2的“指纹峰”，分别介于麦芽五糖到麦芽六糖和麦芽六糖到麦芽七糖之间，属于典型的掺入果葡糖浆的蜂蜜。而图5只出现了一个介于麦芽五糖到麦芽六糖P1峰，介于麦芽五糖和麦芽六糖之间，与标准GB/T 21533-2008中判定蜂蜜掺假的标准有所不同，可能由于掺入的果葡糖浆的种类不同导致。

2.2实际样品的测定结果

 此次抽取市场上的蜂蜜共60个批次，包括洋槐蜜、油菜蜜、刺槐蜜、荞麦蜜、紫云英蜜、椴树蜜、枣花蜜、枇杷蜜、野桂花蜜、玫瑰蜜、柑橘蜜、冬蜜和百花蜜等。分别按标准方法进行处理和测试，样品测定结果和部分阳性结果谱图分别如表2和图6所示。

 如表2所示，所抽取的60个批次的蜂蜜中有9个显示果葡糖浆显阳性，不合格率为15% ，总体来讲不太乐观。从图6可以看出，很少有样品的谱图的寡糖峰出现在麦芽七糖之后，这可以说明市场上惨假的蜂蜜以添加果葡糖浆为主，由于添加的种类不同，所出现的谱图有的会出现典型的P1和P2“指纹峰”，如图6中样品5、6和7。依据GB/T 21533-2008可以顺利地判断出掺入了果葡糖浆；但有的只会出现一个介于麦芽五糖和六糖之间的P1峰，如图6中的样品2、3和4，和图4中阳性对比品2进行对比，暂且可以判定为加入果葡糖浆的蜂蜜，但还需进一步加标验证。

2.3方法的验证

 对于非典型的只出现一个P1峰的阳性样品，进行了5%的F95型果葡糖浆加标试验，选取其中的一个结果，如图7所示。

 从结果中可以看出，对于只出现一个P1峰的阳性样品（图7中的样品1）进行5%的F95型果葡糖浆加标（图7中的样品2）重现性良好，两个峰的位置重叠，可以进一步判定其样品中添加了果葡糖浆，所以此种只出现个P1峰的样品可以作为判定其蜂蜜掺假的一个辅助参考。

3结论

 通过标准品的谱图、纯蜂蜜的谱图和阳性样品的谱图，重复性试验结果良好，可以很好地从GB/T21533中判断掺假蜂蜜的情况。从检测结果来看，对于市场上的蜂蜜的掺假情况不容乐观，惨假的蜂蜜以添加果葡糖浆为主。对于标准中未提及的判断情况即只出现一个介于麦芽五糖和六糖之间P1峰的样品，进行加标试验，结果良好，可将其判断为添加了淀粉糖浆的蜂蜜。这种只出现一个P1峰，P2峰不明显的情况，亦可作为判定蜂蜜掺假的依据。