LC-MS/MS测定荷瘤裸鼠血浆中和厚朴酚脂质体浓度及其药代动力学研究

丁士雯1.2，马红霞1，李娴2，刘运龙2，陈知航2，单成启2，程远国2，陈俐娟3

1. 吉林农业大学动物科技学院，吉林长春130118;
2. 军事医学科学院微生物流行病研究所，北京100071：

3．四川大学生物治疗国家重点实验室，四川成都610041

[摘  要]  目的：建立测定荷瘤裸鼠血浆中和厚朴酚脂质体的高效液相色谱一质谱联用( LC-MS/MS)法，并进行荷瘤裸鼠体内药代动力学研究。方法：采用YMC Cl。（100 mmx2.1mm，1.7μm）色谱柱，流动相B为0.025%氨水乙腈，A为0.025%氨水，在线脱气，流速0.8 mL/min：梯度洗脱：0-2  min，B相85%-85%；2-4  min，B相85%-10%；4-6  min，B相10%-85%；6-8  min，B相85%-85%，柱温40℃。进样量10μL。质谱条件：离子源电喷雾电离源(ESI)，负离子电离模式，扫描方式多级反应监测(MRM)．监测离子对m/z和厚朴酚(265.0→223.0)和内标(253.0→225.0)．、结果：血浆中无干扰测定的内源性物质，每个样品的分析时间为8 min;和厚朴酚在0.500-1000ng/mL呈良好的线性关系，定量下限为0.500 ng/mL，日内、日间精密度RSD均小于15%，低、中、高3种浓度的提取回收率>64.71%。稳定性实验中，在各种贮存条件下血浆中和厚朴酚均较稳定，结论：本方法操作简便，特异性强，灵敏度高，可用于和厚朴酚脂质体的药代动力学研究，以期为临床应用提供参考一

[关键词]和厚朴酚脂质体；液质联用；梯度洗脱；药代动力学

[中图分类号]Q503; 1196 [文献标识码]  A [文章编号]  1009-0002( 2015 )06-0809-06

1  材料与方法

1.1  材料

 1.2溶液配制

1.3分析条件

1.3.1  液相条件 

1.3.2质谱条件离子源电喷雾电离源(ESl)，负离子电离模式，雾化气50 psi，加热辅助气50 psi，源温度为600℃，毛细管电压-4000 V，扫描方式多级反应监测(MRM)，监测离子对m/z和厚朴酚(265.O-}223.0)和内标(253.0—225.0)，和厚朴酚和内标碰撞能量分别为-41和-39 V。

1.4样品处理

  1.5  受试动物给药方案

2结果

2.1质谱分析

2.2方法学考察

2.2.1  方法专属性

 2.2.2线性关系及定量下限

  2.2.3回收率

2.2.4基质效应

2.2.5  稀释效应  

 2.2.6  精密度与准确度 

2.2.7稳定性实验

2.2.8  药代动力学研究

3讨论

 综上，通过优化条件，本实验中样品采用直接沉淀法，操作简单，血浆样品用量仅需45μL，定量下限为0.500 ng/mL(n=5)，分析每个样品仅需8 min，而且该法具有良好的精密度和准确度，适合和厚朴酚脂质体药代动力学研究和血药浓度监测。