作者:张文
抗氧化肽是目前的研究热点,一些动、植物蛋白在适宜的作用条件下可产生具有抗氧化活性的肽,对以动物蛋白为原料的抗氧化肽的研究,主要集中在草鱼、鱿鱼、蓝园鲹、鲢鱼、猪血、鸡肉等 。试验前期研究了马鹿血低聚肽的抗氧化活性,在此基础上,分析了实验室按工业化生产条件自制的马鹿血低聚肽的氨基酸组成,通过AAS和CS对鹿血低聚肽进行了营养价值评价,并对鹿血低聚肽氨基酸组成与抗氧化活性的关系进行初步分析,旨在为鹿血低聚肽作为具有抗氧化活性的营养补充剂的生产和应用提供参考依据。
1 仪器、试剂与材料
1.1仪器与设备
RART NO.835-0200氨基酸自动分析仪:日本 Hitachi:ZFD-5090电热恒温干燥箱:上海至诚分析仪器制造厂。
1.2试剂
浓盐酸、苯酚、柠檬酸钠、氢氧化钠、氯化钠、茚三酮、乙酸锂、氢氧化锂、二甲基亚砜、冰乙酸均为分析纯,高纯氮气:纯度99.99%。
1.3材料
鹿血低聚肽(由中科院西北特色植物资源化学重点实验室提供):为白色粉末,系新鲜马鹿鹿血经酶解、分离、脱色所得,经HPLC测定其中90%内容物分子量小于1000 Da。
2方法
2.1 溶液的配制
试验中所用溶液均按照GB/T 5009.124-2003方法配制。
2.2氨基酸含量测定
精密称取10 mg鹿血低聚肽,置于安培瓶中,加入6 mol.L-1盐酸,抽真空、充氮气密封后在110℃±1℃水解22 h,反复减压蒸干去掉HCI。然后用1mL pH为2.2的磷酸缓冲液溶解,用氨基酸自动分析仪进行测定[2]。
2.3鹿血低聚肽营养价值评价指标的计算
2.3.1 必需氨基酸质量分数的计算
必需氨基酸( EAA)含量与氨基酸总量(TAA)之比( EIT),必需氨基酸与非必需氨基酸(NEAA)之比( EIN)按式(1)~(2)计算。
2.3.2氨基酸评价指标的计算
根据FAO/WHO/UNU 1985年推荐的氨基酸评分模式[4] ,选择成人组评分模式按式(3)~(4)计算鹿血低聚肽中必需氨基酸评分( AAS)和化学评分 ( CS)。
3结果与分析
3.1 氨基酸组成及必需氨基酸质量分数鹿血低聚肽氨基酸含量测定结果,见表1。
鹿血低聚肽中含有丰富的甘氨酸、谷氨酸、精氨酸、赖氨酸、酪氨酸,此类氨基酸的摄人可调节氨基酸在体内的吸收,保证蛋白质的营养均衡;大量的赖氨酸和精氨酸,能刺激合成代谢激素的分泌,促进肌肉生长;支链氨基酸(如亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸)含量达17.99%,可以作为能源物质提供能量。
根据FAO/WHO提出的理想模式,蛋白质氨基酸组成EAA/TAA在40%左右而FAA/NEAA在60%以上说明蛋白质质量较好。鹿血低聚肽中总氨基酸含量达到74.49%,其中必需氨基酸含量为36.87%,EAA/TAA值为49.5%,EAA/NEAA值为98%。因此,鹿血低聚肽是优质的蛋白源。
3.2氨基酸评分和化学评分
试验以粗蛋白为基数计算氨基酸评价指标,结果见表2。
如表2所示,和大多数良好的食物蛋白源(如鸡蛋、牛奶等)相同,鹿血低聚肽的第一限制性氨基酸仍是色氨酸,除色氨酸外其他必需氨基酸含量都高于WHO/FAO推荐值,均能满足人体需要;其AAS和CS均较高。
3.3鹿血低聚肽抗氧化活性氨基酸含量
鹿血低聚肽中含硫氨基酸的总量为33.3 mg.g-1,疏水性氨基酸含量为274.7 mg.g-1,与抗氧化活性相关的氨基酸[5-7]总量为308 mg.g。1,占氨基酸总量的30.8%,与试验前期对鹿血低聚肽抗氧化活性的研究结果[1}-致。
4结论与讨论
鹿血低聚肽中总氨基酸含量达到74.49%,赖氨酸和精氨酸含量为9.12%,能促进肌肉生长;支链氨基酸含量达17.990/0,能作为能源物质提供能量;
鹿血低聚肽中必需氨基酸含量为36.87%,EAA/TAA值为49.5%,EAA/NEAA值为98%,与抗氧化活性相关的氨基酸占氨基酸总量的30.8%。据文献[8],生物活性肽大致可分为生理活性肽、抗氧化肽、调味肽和营养肽。因此,鹿血低聚肽不仅有营养价值,还有生物活性,可作为优质蛋白源和生物活性肽开发。
5摘要
利用GB/T 5009.124-2003方法测定鹿血低聚肽的氨基酸组成,通过AAS和CS评价了鹿74.49%营养价值’并对其氨基酸组成与抗氧化活性的关系进行初步分析。结果显示,鹿血低聚肽总氨基酸含量达到74.49%,其中必需氨基酸含量为36.87%, EAA/TAA值为49.5%, EAA/NEAA值为98%; AAS和CS均较高,第一限制性氨基酸为色氨酸,除色氨酸外其他必需氨基酸含量都高于WHO/FAO推荐值,均能满足人体需要。鹿血低聚肽中与抗氧化活性相关的氨基酸占总量的30.8%,与鹿血低聚肽的抗氧化活性一致。关键词 鹿血低聚肽;氨基酸;EAAI;抗氧化活性